| 籼稻姊妹染色单体粘着蛋白OsRad21-i基因的原核表达载体构建与表达 |
| 康海岐
; 申国安
; 杨金水
; 程在全
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| 2009
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发表期刊 | 中山大学学报:自然科学版
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ISSN | 0529-6579
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卷号 | 48期号:1页码:62-66 |
摘要 | 以杂交水稻汕优63的根组织cDNA为模板,采用引物设计引入酶切位点和RT—PCR方法,扩增出了籼稻姊妹染色单体粘着基因OsRad21-i(AY318757)开放阅读框(ORF),命名为Eqfr,两端分别带有BamHI和Sal Ⅰ限制性位点。然后克隆到pGEM—T载体,将重组克隆载体pGEM—T—Eqfr与表达载体pQE30分别同时进行BamHI和SalⅠ双酶切,连接酶切后的Eqfr和pQE30,并转化DH5α感受态细胞,获得了DH5et[pQE30-Edfr]重组克隆。再以其重组质粒转化M15[pREP-4]感受态细胞,筛选出M15[pQE30-Eqfr,pREP-4]重组克隆。通过诱导表达,检测到了相对分子质量约为116000的重组蛋白表达,在诱导后的1~3h里表达量较高,之后表达量开始下降。用实验证实了理论推测ORF的正确性,所获得的表达蛋白及其表达体系为下一步的蛋白质实验奠定了基础。 |
关键词 | 杂交籼稻
姊妹染色单体粘着蛋白
Osrad21-i
原核表达
载体构建
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收录类别 | cscd
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语种 | 中文
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引用统计 |
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文献类型 | 期刊论文
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条目标识符 | http://ir.kib.ac.cn/handle/151853/6061
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专题 | 资源植物与生物技术所级重点实验室
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推荐引用方式 GB/T 7714 |
康海岐,申国安,杨金水,等. 籼稻姊妹染色单体粘着蛋白OsRad21-i基因的原核表达载体构建与表达[J]. 中山大学学报:自然科学版,2009,48(1):62-66.
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APA |
康海岐,申国安,杨金水,&程在全.(2009).籼稻姊妹染色单体粘着蛋白OsRad21-i基因的原核表达载体构建与表达.中山大学学报:自然科学版,48(1),62-66.
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MLA |
康海岐,et al."籼稻姊妹染色单体粘着蛋白OsRad21-i基因的原核表达载体构建与表达".中山大学学报:自然科学版 48.1(2009):62-66.
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文件名:
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20111201048.pdf
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格式:
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