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题名: 籼稻姊妹染色单体粘着蛋白OsRad21-i基因的原核表达载体构建与表达
作者: 康海岐 ; 申国安 ; 杨金水 ; 程在全
刊名: 中山大学学报:自然科学版
关键词: 杂交籼稻 ; 姊妹染色单体粘着蛋白 ; OsRad21-i ; 原核表达 ; 载体构建
中文摘要: 以杂交水稻汕优63的根组织cDNA为模板,采用引物设计引入酶切位点和RT—PCR方法,扩增出了籼稻姊妹染色单体粘着基因OsRad21-i(AY318757)开放阅读框(ORF),命名为Eqfr,两端分别带有BamHI和Sal Ⅰ限制性位点。然后克隆到pGEM—T载体,将重组克隆载体pGEM—T—Eqfr与表达载体pQE30分别同时进行BamHI和SalⅠ双酶切,连接酶切后的Eqfr和pQE30,并转化DH5α感受态细胞,获得了DH5et[pQE30-Edfr]重组克隆。再以其重组质粒转化M15[pREP-4]感受态细胞,筛选出M15[pQE30-Eqfr,pREP-4]重组克隆。通过诱导表达,检测到了相对分子质量约为116000的重组蛋白表达,在诱导后的1~3h里表达量较高,之后表达量开始下降。用实验证实了理论推测ORF的正确性,所获得的表达蛋白及其表达体系为下一步的蛋白质实验奠定了基础。
出版日期: 2009
卷号: 48, 期号:1, 页码:62-66
语种: 中文
收录类别: cscd
ISSN号: 0529-6579
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内容类型: 期刊论文
URI标识: http://ir.kib.ac.cn/handle/151853/6061
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康海岐;申国安;杨金水;程在全.籼稻姊妹染色单体粘着蛋白OsRad21-i基因的原核表达载体构建与表达,中山大学学报:自然科学版,2009,48(1):62-66
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