提供长柱重楼[Parisforrestii(Takht.)H.Li]抗癌活性部位PFE-PT3及其中的化学成分的提取和鉴定方法。采用色谱柱层析及半制备高效液相色谱的分离方法，以及质谱和核磁共振波谱的鉴定方法，从PFE-PT3中分离、鉴定出了重楼皂苷I、重楼皂苷II、重楼皂苷III、重楼皂苷V、重楼皂苷H、偏诺皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基-(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(PGRR)、甲基原重楼皂苷I、甲基原重楼皂苷V、PariposideA和β-蜕皮激素。本发明首次阐明PFE-PT3的主要化学成分，通过提供的方法，可以简单、快速地从PFE-PT3中获取上述化学成分，用于建立PFE-PT3的质量控制标准。