竹类植物开花时间相关基因的克隆与功能分析

	竹类植物开花时间相关基因的克隆与功能分析
其他题名	Isolation and characterization of bamboo flowering time genes
	田波
导师	李德铢
学位专业	植物学
关键词	竹类植物 Mads-box基因原位杂交转基因植物 Co-hke基因
摘要	花发育是有花植物生活史中一个极其重要而复杂的事件，它既涉及到细胞的分裂与分化，又涉及到组织和器官的形成，它既受环境因子的影响，又受自身生理信号的调控，它是一系列基因表达综合作用的结果。本论文在本实验室已克隆到一些麻竹MADS-box基因的基础上，对其中两个基因进行了功能分析；同时，通过TD-PcR方法从草丝竹的总DNA中克隆了其CO-like基因的全长，并利用GENSCAN在线预测了其结构。主要研究结果如下：IDIMADS的表达模式以引种栽培的麻竹的花为材料，进行RT-PCR和RNA原位杂交实验，结果表明，DIMADSS在麻竹成熟花的雄蕊表达强烈，主要集中在花粉囊和花粉粒，在雌蕊和内释有微弱的表达，而在外释和颖片中不表达。该表达模式与水稻的OSMADS5的表达模式极为相似。DIMADS8和OSMADS5均为sEP-like基因，DIMADS8可能只是麻竹中多个SEP-like基因中的一个。ZDIMADS8和DIMADS8基因的异位表达利用双元载体pCambia2301和pWM101构建了一个含GuS报告基因和NPT 11基因的中间表达载体pCambia23ol-101。将DIMADS8和DIMADS18分别置于CoMV355启动子下转化拟南芥355D劫了注DSS转基因的拟南芥植株叶卷曲，开花时间提前，抽苔后表现出三种不同的表型。表型I植株不产生二级花序，Northern杂交只检测到很弱的信号，DI彻DSS可能与拟南芥的内源基因发生了共抑制；表型n植株茎生叶严重卷曲，花瓣和花曹发育迟缓，不能完全覆盖雌雄蕊；表型111植株抽苔后产生顶花，顶端优势明显减弱，二级花序发达。表型n、m植株均检测到很强的D从似DSS表达信号。35斗D从“Ds18转基因高表达植株开花时间明显提前、叶卷曲、植株矮小、产生顶花。总之，D动翻DSS和力从侧DS18可能参与调控麻竹的开花时间，其表达可能受BA的诱导。3竹类植物CO-like基因的克隆以灌木状竹类植物草丝竹（Yushaniaandropogonoides）的总DNA为模板，通过TD-PCR和常规PCR方法克隆到一个CO-like基因YaCO了。GENSCAN在线预测结果表明，该基因有一个长达567bp的内含子，开放读码框长IO32bp，推导编码344个氨基酸，与小麦的TaHd的氨基酸相同率最高（64％）。在氨基酸序列的氨基端，有一个类似锌指蛋白的B一box结构域（cxZcxscx7CxZCx4Hx8H），梭基端有一个由43个氨基酸组成的CCT结构域。
语种	中文
	2005
学位授予单位	中国科学院昆明植物研究所
文献类型	学位论文
条目标识符	http://ir.kib.ac.cn/handle/151853/788
专题	昆明植物所硕博研究生毕业学位论文
推荐引用方式 GB/T 7714	田波. 竹类植物开花时间相关基因的克隆与功能分析[D]. 中国科学院昆明植物研究所. 中国科学院昆明植物研究所,2005.

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