两种植物二萜合酶基因的研究

	两种植物二萜合酶基因的研究
其他题名	Research on Diterpene Synthase Genes from Two Plants
	李军玲
导师	曾英
学位专业	植物学
关键词	毛萼香茶菜古巴焦磷酸贝壳杉烯氧化酶米仔兰 Cdna文库二萜合酶后修饰
摘要	论文第一章为毛萼香茶菜对映-贝壳杉烯类二萜化合物生物合成途径中两个关键酶基因CPS（copalyl pyrophosphate synthase）和KO（kaurene oxidase）的克隆。毛萼香茶菜（Isodon eriocalyx (Dunn) Kudo）属唇形科（Labiatae）香茶菜属（Isodon）植物，其主要的化学成分是对映-贝壳杉烯类二萜（ent-kaurenoids）化合物，具有抗菌、消炎、抗肿瘤活性，但其生物合成途径尚不清楚。我们推测CPS催化GGPP环化生成CDP（Copalyl pyrophosphate）作为合成ent-kaurene的前体，KO则催化ent-kaurene氧化为多种二萜。根据已报道的CPS和KO氨基酸保守序列，分别设计简并引物，用RT-PCR方法获得了基因特异片段，包括2条CPS类似基因（IeCPS1和IeCPS2，核苷酸相似度为69%）特异片段，经blastx在线序列比对，IeCPS1基因片段与甜叶菊（Stevia rebaudiana）的CPS相似度为70%，IeCPS2基因片段与野甘草（Scoparia dulcis）CPS相似度为78%；一条KO类似基因（IeKO）特异片段，与甜叶菊（Stevia rebaudiana）、草莓（Fragaria grandiflora）KO相似度分别为70%、71%；然后设计基因特异引物做RACE-PCR，IeCPS1获得了全长cDNA序列；IeKO和IeCPS2获得了完整的3’ 端，相应的5’ RACE实验仍在进行中。论文第二章是米仔兰二萜合酶基因的克隆。米仔兰（Aglaia odorata Lour）属楝科（Meliaceae）米仔兰属（Aglaia），实验所选的研究材料为温室下经过多代繁殖的栽培苗，其形态结构和其次生代谢产物均已发生很大的变化，其中海兔烷型（dolabellane）二萜化合物是栽培苗才产生的次生代谢产物。本文对海兔烷（dolabellane）的生物合成途径进行了探讨，并根据已经发表的萜类合酶基因，设计简并引物，通过RT-PCR方法获得了1条萜类合酶类似基因特异片段，与其它植物萜类合酶相似度在47%左右。利用SMART技术构建了叶片cDNA文库并尝试RACE-PCR，但均没有获得目的基因全长。论文第三章是综述部分，详述了萜类生物合成途径相关萜类合酶近期的研究进展，重点综述了萜类后修饰酶，包括氧化酶、双键还原酶、酰基转移酶、糖基转移酶。
语种	chi
	2009-05-18
学位授予单位	中国科学院昆明植物研究所
文献类型	学位论文
条目标识符	http://ir.kib.ac.cn/handle/151853/422
专题	昆明植物所硕博研究生毕业学位论文
推荐引用方式 GB/T 7714	李军玲. 两种植物二萜合酶基因的研究[D]. 昆明植物研究所. 中国科学院昆明植物研究所,2009.

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