尖刀唇石斛化学成分及降脂活性天然产物研究
颜莎
导师胡江苗
学位专业药物化学
关键词尖刀唇石斛 酚性化合物 降脂 减肥 ERK1/2 蛋白
摘要本论文主要包括两个方面的内容, 一方面是尖刀唇石斛(Dendrobium heterocarpum Lindl)正丁醇部位化学成分的分离鉴定,另一方面是酚性成分与尖 刀唇石斛中化学成分的生物活性研究。 首先,对当前发现具有潜在减肥活性的化合物及其机理进行简单的综述。 其次利用硅胶柱层析、Diaion HP20SS反相材料、凝胶排阻色谱Sephadex LH-20 以及高效液相色谱等各种分离手段对尖刀唇石斛正丁醇部位进行了提取分离,并 通过分析波谱数据对其中的化学成分进行了鉴定,从该部位分离鉴定 9 个已知化 合物和 1 个新化合物。 再者利用前脂肪细胞 3T3-L1,对课题组前人已分离出的 21 个酚性成分和从尖 刀唇石斛正丁醇部位分离鉴定的质量大于 1 毫克的 9 个分子共 30 个分子进行了前 脂肪细胞的增殖能力检测,最终发现了 9 个单体化合物可以阻止前脂肪细胞的增 长与繁殖(p < 0.05),其中化合物 23 效果最佳(p < 0.0001),接着对这 9 个分子 进行了 3T3-L1 细胞的分化能力检测,没有发现可以阻止其分化的化合物;最后对 其中活性最为显著的化合物 23 进行 Hoechst 33258 染色和 Annexin V-FITC/PI 染色, 通过 Western Blot 蛋白印记实验检测前脂肪细胞中 ERK1/2 蛋白表达情况,实验结 果表明化合物 23 可以引起 3T3-L1 细胞的凋亡同时降低其中总的和磷酸化的 ERK1/2 蛋白的表达量。 另外对可以抑制前脂肪细胞增殖的化合物 21 即芒果苷用 C57BL/6J 小鼠进行 了体内降脂减肥活性实验探索。按照芒果苷 50 mg/kg/d 和 200 mg/kg/d 的剂量对 小鼠采用灌胃的方式给药,实验结束后检测小鼠血清中 TC、TG、LDL-C、HDL-C、 瘦素水平,结果表明芒果苷可以使 C57BL/6J 小鼠体重下降,降低其血清内 TC、 LDL 、瘦素的浓度;通过 Western Blot 蛋白印记实验检测经过芒果苷不同浓度(10 μM ~ 60 μM)刺激 48 h 后 3T3-L1 内 ERK1/2 蛋白表达水平,结果显示芒果苷(10 μM)可以抑制 3T3-L1 中磷酸化的 ERK1/2 蛋白的表达。以上实验事实表明芒果 尖刀唇石斛化学成分及降脂活性天然产物研究 II 苷具有降血脂活性和减肥活性,同时可能是通过降低小鼠血清中 TC、LDL-C、瘦 素的水平以及 3T3-L1 细胞内磷酸化的 ERK1/2 蛋白的表达来发挥作用的。 最后对本论文各个部分的实验进行总结。
2019-06
学位授予单位云南大学
学位名称硕士
文献类型学位论文
条目标识符http://ir.kib.ac.cn/handle/151853/73975
专题昆明植物所硕博研究生毕业学位论文
推荐引用方式
GB/T 7714
颜莎. 尖刀唇石斛化学成分及降脂活性天然产物研究[D]. 云南大学,2019.
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