Knowledge Management System of Kunming Institute of Botany,CAS
| 安丝菌素生物合成的后修饰研究 | |
| 其他题名 | Post-PKS Modifications Study of Ansamitocin Biosynthesis |
| 代焕琴 | |
| 导师 | 郝小江 |
| 学位专业 | 植物学 |
| 关键词 | 安丝菌素酰胺n-苷 聚酮后修饰 酰胺n-糖基转移酶 Fadh2依赖型卤代酶 |
| 摘要 | 本文从基因失活、突变体次生代谢产物的分析、基因异源表达、重组蛋白催化特性几方面对安丝菌素后修饰酶Asm25(酰胺N-糖基转移酶)和Asm12（氯代酶）的功能进行了研究。同时还从云南美登木(Maytenus hookeri)的内生放线菌CS中克隆到了一个FADH2依赖型卤化酶并对其体外催化特性进行了研究。 通过基因敲除的方法得到糖基转移酶基因asm25的失活质粒，利用接合转移导入野生型菌株替换野生型的基因得到了突变体。Asm12是安丝菌素生物合成途径中编码卤代酶的基因，克隆asm12基因到pET32a+中，在大肠杆菌E. coli BL21(DE3)plysS成功表达了C端带有His标签的可溶性蛋白。通过MS 和 NMR来检测无细胞提取物及纯酶的体外催化活性，结果证明异源表达的Asm12 能转化proansmitocin生成19-chloroproansmitocin，但是不能催化L- tryptophan进行氯取代。 云南美登木的内生菌CS产生化合物naphthomycin A，其结构中含一个氯原子，根据FADH2－依赖型卤化酶的保守区设计简并引物从CS的基因组DNA中扩增到了卤代酶的基因片段cshaloA，以该基因片段作探针通过克隆杂交筛选，从CS基因组文库中得到了cshaloA的全长基因。本文的研究结果为选择性分离安丝菌素的衍生物提供了新的思路，另外酰胺N-糖基转移酶的初步研究也可以为进一步研究提供参考。 |
| 语种 | 中文 |
| 2006-01-23 | |
| 学位授予单位 | 中国科学院昆明植物研究所 |
| 文献类型 | 学位论文 |
| 条目标识符 | http://ir.kib.ac.cn/handle/151853/34 |
| 专题 | 昆明植物所硕博研究生毕业学位论文 |
| 推荐引用方式 GB/T 7714 | 代焕琴. 安丝菌素生物合成的后修饰研究[D]. 昆明植物研究所. 中国科学院昆明植物研究所,2006. |
| 条目包含的文件 | ||||||
| 文件名称/大小 | 文献类型 | 版本类型 | 开放类型 | 使用许可 | ||
| 10001_20021801060212（17142KB） | 限制开放 | -- | 请求全文 | |||
| 个性服务 |
| 推荐该条目 |
| 保存到收藏夹 |
| 查看访问统计 |
| 导出为Endnote文件 |
| 谷歌学术 |
| 谷歌学术中相似的文章 |
| [代焕琴]的文章 |
| 百度学术 |
| 百度学术中相似的文章 |
| [代焕琴]的文章 |
| 必应学术 |
| 必应学术中相似的文章 |
| [代焕琴]的文章 |
| 相关权益政策 |
| 暂无数据 |
| 收藏/分享 |
除非特别说明，本系统中所有内容都受版权保护，并保留所有权利。
修改评论